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各種HRP酶標記成抗體的效價測定程序如下（如：羊抗鼠IgG-HRP的效價測定）：

1、抗原包板：15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔；

2、37°C包被60min或4°C過夜；

3、PBST洗板3次，5min/次；

4、加入倍比稀釋的HRP標記抗體 0.1ml/孔；

5、37°C 30min；

6、PBST洗板5min/次×3；

7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min；

8、終止液：2N H2SO4 0.05ml/孔；

9、450nm 測定OD值；

10、陽性O(shè)D值比對照值大3倍，為判斷效價稀釋度。